肝缺血(HI)大鼠模型

英文名称：Rat Model for Hepatic Ischemia (HI)

• 货号DSI527Ra01
• 物种Human
• 实验方法
• 反应时长
• 检测范围
• 灵敏度
• 样本类型
• 残基和标签
• 预测分子量
• 实际分子量
• 纯度
• 亚细胞定位
• 等电点
• 指标简称Hepatic Ischemia
• 指标别名
• 缓冲液
• 特点
• Tag
• 研究领域
• 引用
• 表达体系
• 宿主来源缺血再灌注
• 应用Disease Model|疾病模型
• 网站链接http://www.cloud-clone.com/products/DSI527Ra01.html
• 说明书链接
• 规格
• 曾用名Hepatic ischemia/reperfusion; Liver ischemia
• 模式动物品系SD大鼠，SPF级，健康，雄性，体重：200g~220g
• 实验分组对照组，模型组，阳性药物组，受试药物组，15只每组
• 建模方法1.选取体重250g-300g大鼠，行术前12 h禁食，自由饮水。
  2.15%水合氯醛350mg/kg腹腔注射麻醉，麻醉成功后将大鼠平躺在手术台上胶带固定四肢，将大鼠腹部至剑突术区剃毛 ，用 10％碘酒和75％乙醇术区消毒。
  3.取腹正中切口1cm，打开腹腔，小心分离出肝脏左、中叶之肝蒂（左、中叶肝脏供血的门静脉和肝动脉）。
  4. 用无创血管夹夹闭中叶和左叶的门静脉和肝动脉，使约70%的肝脏缺血，以防止发生严重肠系膜静脉淤血。0.5min后，与非阻断的右叶相比，肉眼可见阻断叶明显变白，说明阻断成功，用止血钳夹闭皮肤切口临时关闭腹腔，同时将大鼠放在37℃恒温加热垫上保温。
  5. 完成持续缺血60min后，重新打开腹腔，迅速取出血管夹，恢复缺血肝血流，0.5min左右可见缺血区肝脏由白色逐渐恢复为鲜红色表明再灌注成功，逐层缝合腹腔肌肉和皮肤关闭腹腔，完成手术。待大鼠清醒后放回饲养室饲养，密切关注大鼠的状态及生存状况并做好记录。
  6. 术后分别于再灌注0h、3h、6h、12h、24h及72h处死大鼠，下腔静脉取血1ml，室温静置2h后于4℃3000r离心10分钟提取血清，放入-80冰箱冻存。采用全自动生化分析仪检测血清中ALT（谷丙转氨酶）、AST（天门冬氨酸氨基转移酶）的水平。同时统一取肝左叶组织1．5cm×1cm×0．2cm留作病理标本或分生标本。
  
  注意事项
  1.分离肝门时用棉签分离，可避免对肝脏的损伤
  2.术前禁食有利于手术进行
  3.阻断血流要一次成功，否则会造成缺血预处理，减轻损伤程度
  4.再灌后用棉签轻轻按压肝脏，有利于血流恢复
  5.取材时镊子不要损伤肝脏
• 模型评价肝脏缺血损伤评分：
  0分：无肝细胞损伤
  1分：轻度损伤，特点为细胞质空泡化，病灶核固缩
  2分：中度损伤，血窦膨胀，细胞溶质空泡化，细胞边界模糊
  3分：中度到重度损伤，凝固性坏死，大量血窦膨胀，红细胞渗出到肝锁，嗜伊红细胞增多，中性白细胞着边（附着于血管壁）
  4分：严重坏死，失去肝脏结构，肝索崩解，出血，嗜中性粒细胞渗入
• 组织病理学取肝左叶组织1.5cm×1cm×0.2cm于4%多聚甲醛溶液中固定24h后脱水，包埋，进行石蜡切片后行HE染色，tunel染色。作坏死评分。肝小叶结构严重破坏，网状纤维支架塌陷，肝细胞坏死，空泡变样，肝细胞索、肝窦充血肿胀，边界不清，周围有炎性细胞浸润。
• 标志因子水平分别检测术后0h、3h、6h、12h、24h及72h大鼠血清中ALT（谷丙转氨酶）、AST（天门冬氨酸氨基转移酶）的水平。
• 样品类型
• 参考文献
• 品系
• 组织来源
• 生长状态
• 细胞类型
• 疾病
• 培养条件
• 浓度
• 免疫原
• 性状
• 纯化方式