慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠模型

英文名称：Rat Model for Chronic Obstructive Pulmonary Disease (COPD)

• 货号DSI557Ra02
• 物种Human
• 实验方法
• 反应时长
• 检测范围
• 灵敏度
• 样本类型
• 残基和标签
• 预测分子量
• 实际分子量
• 纯度
• 亚细胞定位
• 等电点
• 指标简称Chronic Obstructive Pulmonary Disease
• 指标别名
• 缓冲液
• 特点
• Tag
• 研究领域
• 引用
• 表达体系
• 宿主来源吸烟致慢性阻塞性肺病
• 应用Diesase model|疾病模型
• 网站链接http://www.cloud-clone.com/products/DSI557Ra02.html
• 说明书链接
• 规格
• 曾用名
• 模式动物品系SPF级SD大鼠，健康，3-4W，雄性，体重为190-230g。
• 实验分组实验分两组：正常对照组和模型组。
• 建模方法1. 第1天、第14天将大鼠用乙醚吸入麻醉后，暴露喉头，以静脉套管针替代气管导管行气管插管，向大鼠气管内注入200 μg/kg（200 μg/ml溶于生理盐水中） LPS（lipopolysaccharide，脂多糖），完毕后将大鼠直立旋转10-20s，使LPS均匀分布于肺部。
  2. 第2-13天，15-28天，每天在有机玻璃密闭箱（70×60×60cm3）持续吸入新鲜的香烟雾45min，15支/天，使密闭箱烟雾浓度约为100-120 mg/m3。每天熏烟后立刻用低于环境温度（20℃）5℃冷空气刺激1小时，造模28天结束。
• 模型评价1. 观察各组大鼠的活动量、毛发、食量、呼吸、体重等。每周给食前1h称重，观察体重的变化。
  2. RT-qPCR检测
  收集大鼠PBMC和肺组织，提取RNA，利用RT-PCR检测Foxp3、RORγT的表达。
  3. Western blot检测
  收集大鼠PBMC和肺组织，提取蛋白，采用western-blot检测TAZ水平。
  4. 流式细胞检测外周血T淋巴细胞亚群
  收集各组大鼠腹主动脉血2ml左右，利用大鼠外周血淋巴细胞分离液提取外周血单个核细胞（PBMC）细胞悬液。
  （1）检测Th17时，细胞悬液加入佛波酯（50ng/ml）、离子霉素（1μg/ml）和莫能菌素（2μmol/L），37℃、5%CO2培养箱终培养6h后，反复洗涤3次后100μL PBS重悬，然后加入CD4单克隆抗体10μL，混匀后4℃避光孵育30min，洗涤、固定、破膜，再加入IL-17单克隆抗体10μL，4℃避光孵育20min，反复洗涤后PBS重悬为500μL/管，样品置流式细胞仪检测CD4+IL-17+细胞占CD4+T细胞的比例。
  （2）检测Treg细胞时，细胞悬液先加入CD4、CD25单克隆抗体各10μl，混匀后4℃避光孵育30min，洗涤、固定、破膜，再加入FoxP3单克隆抗体10μL，4℃避光孵育20min，反复洗涤后PBS重悬为500μL/管，样品置流式细胞仪检测CD4+CD25+FoxP3+细胞占CD4+T细胞的比例。
• 组织病理学HE染色：右肺叶组织固定包埋切片，HE染色，观察肺组织病理变化情况。
• 标志因子水平ELISA检测：
  检测血清和支气管肺泡灌洗液中的IL-17和IL-10水平。
  支气管肺泡灌洗液（BALF）抽取方法：大鼠取血后，开胸，分离纵膈，注射器抽取3ml生理盐水从气管插管推入肺中，每次反复灌洗3次后抽出灌洗液，肺泡灌洗液以4℃ 3000r/min离心15min，取上清。
  血清提取方法：将收集于血清分离管中的全血标本在室温放置 2 小时或 4oC 过夜，然后 1,000×g 离心 20 分钟，取上清即可，将上清置于-20oC 或-80oC 保存，避免反复冻融。
• 样品类型
• 参考文献
• 品系
• 组织来源
• 生长状态
• 细胞类型
• 疾病
• 培养条件
• 浓度
• 免疫原
• 性状
• 纯化方式